做microRNA報告基因?qū)嶒灻赓M贈送生物信息學(xué)服務(wù)！

                                                   microRNA定量PCR 40元/孔！
                                                    microRNA-Seq  4500元/樣本（10M reads）!

    
    英拜生物可為您提供microRNA生物信息學(xué)分析到報告基因載體構(gòu)建、檢測服務(wù)整套服務(wù)，可加速科研人員對microRNA的功能研究。深入的生物信息學(xué)分析不僅可以為microRNA功能研究指引方向，也是解析microRNA調(diào)控網(wǎng)絡(luò)的必備利器。
本公司采用 的psiCHECK-2報告基因載體，具有多克隆位點，方便插入目的靶點序列，用于終點法的細胞裂解物檢測，包含螢火蟲熒光素酶基因，使海腎熒光素酶的表達水平歸一化，所以無須通過共轉(zhuǎn)染進行歸一化，令該系統(tǒng)更可靠、重現(xiàn)性更好。本公司專業(yè)技術(shù)服務(wù)人員就可替您完成載體構(gòu)建，為您節(jié)省大量的時間和精力。


英拜生物microRNA報告基因?qū)嶒灹鞒蹋?br/>1.microRNA靶點的預(yù)測
利用Targetscan,miRanda,Microcosm,Pita等軟件得到目的microRNA的預(yù)測靶點序列(客戶提供或由我公司預(yù)測)。
2.獲得microRNA靶點序列
根據(jù)提供的靶序列，合成兩條互補的單鏈DNA模板。或者，設(shè)計引物PCR擴增目的microRNA靶基因3’UTR序列。
3.microRNA靶序列克隆
將合成的兩條單鏈退火成雙鏈（具有粘性末端），或?qū)CR產(chǎn)物雙酶切，后連入經(jīng)過同樣雙酶切的psicheck報告基因載體中，連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化大腸桿菌DH5α。
4.陽性克隆鑒定。
挑選轉(zhuǎn)化的菌落，雙酶切鑒定陽性克隆，并測序驗證克隆的序列和目的microRNA靶序列一致。
5.細胞轉(zhuǎn)染準(zhǔn)備
將含目的microRNA靶基因的psicheck報告基因載體和microRNA mimics或microRNA negative control共轉(zhuǎn)染293T或Hela細胞。
6.熒光素酶檢測
共轉(zhuǎn)染細胞24-72h后，進行雙熒光素酶檢測。
7.整理分析數(shù)據(jù)，得出結(jié)論。
提供有microRNA靶序列的報告質(zhì)粒一份,甘油保存菌株各一支。附實驗報告，包括載體構(gòu)建過程，鑒定記錄，測序報告，細胞轉(zhuǎn)染，熒光檢測。

在本公司做microRNA靶基因報告基因?qū)嶒灒梢韵硎躠-f中一項免費生物信息學(xué)服務(wù)：

a)差異表達microRNA的篩選和聚類分析
b)microRNA靶基因預(yù)測
c)microRNA與靶標(biāo)基因的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建
d)microRNA與編碼蛋白基因共轉(zhuǎn)錄預(yù)測
e)microRNA與GO的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建
f)microRNA與KEGG Pathway的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建
g)microRNA甲基化位點預(yù)測
h)microRNA轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點預(yù)測
i)microRNA與轉(zhuǎn)錄因子相互調(diào)控網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建
j)轉(zhuǎn)錄因子與microRNA靶標(biāo)基因調(diào)控網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建
k)microRNA 、轉(zhuǎn)錄因子與靶標(biāo)基因三者復(fù)雜調(diào)控網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建